CO2培養(yǎng)箱在細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用

時(shí)間：2024-12-27作者：杭州川一實(shí)驗(yàn)儀器有限公司瀏覽：385

 二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源：細(xì)菌、真菌（霉菌和酵母菌）、病毒、支原體、非同種細(xì)胞。 
      對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō)，理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存，培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的，而細(xì)胞培養(yǎng)部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi)，因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌關(guān)鍵！ 
      細(xì)菌：細(xì)菌污染后，培養(yǎng)基1-2天就會(huì)變色，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯，應(yīng)將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離，滅菌后丟棄，還要用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和凈臺(tái)。 
      病毒：由于病毒寄生生存，爆發(fā)后盡和正常細(xì)胞隔離，丟棄處理，相對(duì)來(lái)說(shuō)處理，對(duì)操作者威脅較大；盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)是不安全的。因此，潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和、干擾素等生物制品制作中的難題。
真菌（霉菌和酵母菌）：真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了；目前沒(méi)有好的抑制方法，包括現(xiàn)在常用的兩性霉素，一旦污染反復(fù)爆發(fā)，尤其孢子很難殺滅。 
支原體：支原體污染后，因?yàn)樗鼈儾粫?huì)使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長(zhǎng)期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細(xì)胞無(wú)明顯變化，外觀上給人以正常感覺(jué)，實(shí)則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響，如引起細(xì)胞變形，影響DNA合成，抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等，往往被大多數(shù)實(shí)驗(yàn)者忽視。 
非同種細(xì)胞：即細(xì)胞交叉污染，由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒(méi)有嚴(yán)格分開，往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。目前，世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染，致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無(wú)效。
因此，以上污染一旦發(fā)生，細(xì)胞*后基本只能丟棄，實(shí)驗(yàn)無(wú)法挽救，對(duì)于許多取樣困難的實(shí)驗(yàn)損失無(wú)法估量！ 
 目前，二氧化碳培養(yǎng)箱的滅菌技術(shù)主要有干熱、濕熱、紫外燈照射、消毒劑擦拭等。 
 高溫干熱空氣滅菌是目前世界公認(rèn)的*有效的滅菌技術(shù)，能消滅所有微生物污染源（包括耐高溫的芽孢桿菌）；濕熱滅菌通常用于高壓蒸汽滅菌中，比較少用在CO2培養(yǎng)箱上，濕熱滅菌在常壓下又叫煮沸法，煮沸的水溫一般至少需為100℃，細(xì)菌繁殖體煮沸5分鐘被殺死，但芽胞常需煮沸2小時(shí)以上才可被殺死；紫外燈照射法的有效性受很多因素影響，如遮擋、時(shí)間、強(qiáng)度、照射距離，濕度等，滅菌效果很難；消毒劑擦拭法是對(duì)表面滅菌的方法，適合于平整的表面如實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，而箱體內(nèi)部設(shè)計(jì)的死角、各種器件因無(wú)法擦拭等因素導(dǎo)致滅菌效果也很有限，而且含氯、碘的消毒劑對(duì)于不銹鋼有腐蝕作用，不能對(duì)不銹鋼箱體進(jìn)行擦拭滅菌。
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  詞條說(shuō)明

• 應(yīng)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)出現(xiàn)的某些錯(cuò)誤的原因

  注意事項(xiàng)應(yīng)用計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)出現(xiàn)的某些錯(cuò)誤的原因：? 取自原始細(xì)胞懸液的不均勻取樣。原始細(xì)胞懸液應(yīng)攪動(dòng)混勻，在細(xì)胞計(jì)數(shù)過(guò)程中細(xì)胞不應(yīng)沉淀至容器的底部。? 計(jì)數(shù)器室內(nèi)充填不夠或過(guò)度填充。計(jì)數(shù)室的容積是基于蓋玻片平穩(wěn)地置于計(jì)數(shù)器邊緣上，過(guò)度充填增加被計(jì)數(shù)的體積。? 細(xì)胞團(tuán)、細(xì)胞團(tuán)不毛吸作用進(jìn)人計(jì)數(shù)室，故被排斥在計(jì)數(shù)之外進(jìn)人計(jì)數(shù)室的小細(xì)胞團(tuán)較難計(jì)數(shù)，甲個(gè)分散狀細(xì)胞懸液對(duì)計(jì)數(shù)來(lái)講是至關(guān)重要的，細(xì)胞應(yīng)混合達(dá)到均勻

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