微生物的檢測(cè),無(wú)論在理論研究還是在生產(chǎn)實(shí)踐中都具有重要的意義,本文對(duì)生長(zhǎng)量測(cè)定法、微生物計(jì)數(shù)法、生理指標(biāo)法和商業(yè)化快速微生物檢測(cè)簡(jiǎn)要介紹了利用微生物重量,體積,大小,生理代謝物等指標(biāo)的二十余種常用的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)要介紹了這些方法的原理,應(yīng)用范圍和優(yōu)缺點(diǎn)。 一個(gè)微生物細(xì)胞在合適的外界條件下,不斷的吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并按自己的代謝方式進(jìn)行新陳代謝。如果同化作用的速度**過(guò)了異化作用,則其原生質(zhì)的總量(重量,體積,大?。┚筒粩嘣黾樱谑浅霈F(xiàn)了個(gè)體的生長(zhǎng)現(xiàn)象。如果這是一種平衡生長(zhǎng),即各細(xì)胞組分是按恰當(dāng)?shù)谋壤鲩L(zhǎng)時(shí),則達(dá)到程度后就會(huì)發(fā)生繁殖,從而引起個(gè)體數(shù)目的增加,這時(shí),原有的個(gè)體已經(jīng)發(fā)展成一個(gè)群體。隨著群體中各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng),就引起了這一群體的生長(zhǎng),這可從其體積、重量、密度或濃度作指標(biāo)來(lái)衡量。微生物的生長(zhǎng)不同于其他生物的生長(zhǎng),微生物的個(gè)體生長(zhǎng)在科研上有困難,通常情況下也沒(méi)有實(shí)際意義。微生物是以量取勝的,因此,微生物的生長(zhǎng)通常指群體的擴(kuò)增。微生物的生長(zhǎng)繁殖是其在內(nèi)外各種環(huán)境因素相互作用下的綜合反映。因此生長(zhǎng)繁殖情況就可作為研究各種生理生化和遺傳等問(wèn)題的重要指標(biāo),同時(shí),微生物在生產(chǎn)實(shí)踐上的各種應(yīng)用或是對(duì)致病,霉腐微生物的防治都和他們的生長(zhǎng)抑制緊密相關(guān)。所以有必要介紹一下微生物生長(zhǎng)情況的檢測(cè)方法。既然生長(zhǎng)意味著原生質(zhì)含量的增加,所以測(cè)定的方法也都直接或間接的以次為根據(jù),而測(cè)定繁殖則都要建立在計(jì)數(shù)這一基礎(chǔ)上。微生物生長(zhǎng)的衡量,可以從其重量,體積,密度,濃度,做指標(biāo)來(lái)進(jìn)行衡量。
1. 微生物計(jì)量法
1.1 體積測(cè)量法
又稱測(cè)菌絲濃度法,通過(guò)測(cè)定體積培養(yǎng)液中所含菌絲的量來(lái)反映微生物的生長(zhǎng)狀況。方法是,取量的待測(cè)培養(yǎng)液(如10 mL)放在有刻度的離心管中,設(shè)定的離心時(shí)間(如5 min)和轉(zhuǎn)速(如5000 rpm),離心后,倒出上清夜,測(cè)出上清夜體積為v,則菌絲濃度為(10-v)/10。菌絲濃度測(cè)定法是大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長(zhǎng)的一個(gè)重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。這種方法比較粗放,簡(jiǎn)便,快速,但需要設(shè)定一致的處理?xiàng)l件,否則偏差很大,由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營(yíng)養(yǎng)物,結(jié)果會(huì)有偏差。
稱干重法
可用離心或過(guò)濾法測(cè)定。一般干重為濕重的10~20%。在離心法中,將體積待測(cè)培養(yǎng)液倒入離心管中,設(shè)定的離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速,進(jìn)行離心,并用清水離心洗滌1~5次,進(jìn)行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干,或采用紅外線烘干,也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥,干燥后稱重。如用過(guò)濾法,絲狀真菌可用濾紙過(guò)濾,細(xì)菌可用醋酸纖維膜等濾膜過(guò)濾,過(guò)濾后用少量水洗滌,在40 ℃下進(jìn)行真空干燥。稱干重發(fā)法較為煩瑣,通常獲取的微生物產(chǎn)品為菌體時(shí),常采用這種方法,如活性干酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌體為活性物質(zhì)的飼料和肥料。
1.3 比濁法
微生物的生長(zhǎng)引起培養(yǎng)物混濁度的增高。通過(guò)紫外分光光度計(jì)測(cè)定波長(zhǎng)下的吸光值,判斷微生物的生長(zhǎng)狀況。對(duì)某一培養(yǎng)物內(nèi)的菌體生長(zhǎng)作定時(shí)跟蹤時(shí),可采用一種特制的有側(cè)臂的三角燒瓶。將側(cè)臂插入光電比色計(jì)的比色座孔中,即可隨時(shí)測(cè)定其生長(zhǎng)情況,而不必取菌液。該法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)。如使用UNICO公司的紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì),在波長(zhǎng)600 nm處用比色管定時(shí)測(cè)定發(fā)酵液的吸光光度值OD600,以此監(jiān)控E.coli的生長(zhǎng)及誘導(dǎo)時(shí)間。
1.4 菌絲長(zhǎng)度測(cè)量法
對(duì)于絲狀真菌和一些放線菌,可以在培養(yǎng)基上測(cè)定時(shí)間內(nèi)菌絲生長(zhǎng)的長(zhǎng)度,或是利用一只一端開(kāi)口并帶有刻度的細(xì)玻璃管,到入合適的培養(yǎng)基,臥放,在開(kāi)口的一端接種微生物,一段時(shí)間后記錄其菌絲生長(zhǎng)長(zhǎng)度,借此衡量絲狀微生物的生長(zhǎng)。
詞條
詞條說(shuō)明
1、微波消解儀要放置在牢固平穩(wěn)的臺(tái)子上,爐體**部及左右不得有遮蓋,且要有5厘米以上的空隙,后壁應(yīng)留有10厘米以上的,保持通風(fēng)良好。2、應(yīng)避開(kāi)加熱源,以免熱氣和水蒸氣進(jìn)入微波爐內(nèi)引起故障,還應(yīng)遠(yuǎn)離自來(lái)水源,以免濺水發(fā)生漏電危險(xiǎn)。3、不要靠近強(qiáng)磁性材料或帶有磁性的電器,因?yàn)橥鈦?lái)磁場(chǎng)會(huì)干擾爐內(nèi)磁場(chǎng)均勻分布使加熱效率下降。4、其他正常實(shí)驗(yàn)室溫度及水電條件。?
使用氮?dú)獍l(fā)生器的注意事項(xiàng): 1、擰下出氣口的螺帽,這時(shí)儀器**板上的豎向數(shù)值顯示為500-550之間。 2、把氣路管的一頭連接儀器背后的氮?dú)獬鰵饪谏蠑Q緊,氣路管另一端連接色譜儀,這時(shí)儀器可以使用了。 3、儀器使用時(shí)應(yīng)注意流量顯示是否與氣相色譜儀的用氣量一致,如儀器的流量顯示**出氣相色譜儀的實(shí)際用量較大時(shí),應(yīng)停機(jī)檢漏。其方法參照儀器的故障原因與排除方法進(jìn)行調(diào)整,再用自檢檢查合格后方可使用。 5、儀器
真空干燥箱是專為干燥熱敏性、易分解和易氧化物質(zhì)而設(shè)計(jì)的,工作時(shí)可使工作室內(nèi)保持的真空度,并能夠向內(nèi)部充入惰性氣體,是一些成分復(fù)雜的物品也能進(jìn)行快速干燥,采用智能型數(shù)字溫度調(diào)節(jié)儀進(jìn)行溫度的設(shè)定、顯示與控制。1樣品放置將需干燥物料均勻放入干燥箱內(nèi)樣品架上,推入干燥箱內(nèi)。注意事項(xiàng):①不可在烘箱加熱狀態(tài)下放置樣品,需在確保加熱關(guān)閉狀態(tài)下放置樣品;②放置樣品時(shí),上下四周應(yīng)留存空間,保持箱內(nèi)氣流暢通;③若樣品
喜訊!重慶醫(yī)科大學(xué)采購(gòu)川宏儀器-三氣培養(yǎng)箱CHSQ-50-III
重慶醫(yī)科大學(xué)(ChongQing Medical University),簡(jiǎn)稱重醫(yī),是中西部高校基礎(chǔ)能力建設(shè)工程和**醫(yī)生教育培養(yǎng)計(jì)劃重點(diǎn)建設(shè)高校之一。2013年國(guó)家將重慶醫(yī)科大學(xué)定為"教育部、衛(wèi)計(jì)委、重慶市'兩部一市共建高校,進(jìn)入未來(lái)的醫(yī)學(xué)教育"國(guó)家隊(duì)",2012年獲教育部批準(zhǔn)成為中國(guó)**獎(jiǎng)學(xué)金院校,2013年又被教育部授予來(lái)華留學(xué)**基地暨來(lái)華留學(xué)"211"院校,成為全國(guó)建設(shè)100所來(lái)華留學(xué)示
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