恒溫培養(yǎng)箱常用于各種細菌細胞培養(yǎng)實驗,那小鼠大腦皮層神經(jīng)元原代細胞是如何培養(yǎng)的的呢?由小喆帶大家了解一下。
小鼠大腦皮層神經(jīng)元原代培養(yǎng)步驟:
1、于無菌條件下切取鼠頭并以75%酒精浸泡1min,解剖出完整鼠腦;
2、預(yù)冷解剖液中分離去除軟膜、血管、取大腦皮質(zhì)漂洗,用眼科剪將皮質(zhì)反復剪切成碎塊;
3、移入培養(yǎng)皿中,吸除解剖液加入0.25%胰蛋白酶2m1,恒溫培養(yǎng)箱中37℃消化30min;
4、將皮層組織碎塊移入離心管,棄去剩余消化液,用接種液洗3次,每次洗滌后使組織塊充分沉降到試管底,棄去上清液;
5、最后再用接種液1ml混懸,反復吹打(巴氏吸管)混懸液中組織塊,力度適中,至渾濁后將上清液移入培養(yǎng)瓶待用;
6、加入1ml接種液后再次吹打,如此反復3-4次,組織塊逐漸消化后,棄去較終殘塊;
7、收集含單細胞懸液的上清液約4-5ml于培養(yǎng)瓶中,以接種液重新懸浮細胞,細胞記數(shù);接種1x107個細胞于6孔培養(yǎng)板中;
8、培養(yǎng)24h至細胞貼壁后,換全培養(yǎng)液(DMEM/F12+2%B27,engreen)培養(yǎng)3d,觀察神經(jīng)元生長狀況;
9、換用阿糖胞苷培養(yǎng)液(終濃度2.5ug/ml,換半液)培養(yǎng)3d以抑制神經(jīng)膠質(zhì)細胞及雜細胞生長,獲得單純培養(yǎng)的原代神經(jīng)細胞;
10、每隔3d換全培養(yǎng)液1次,每次換半液。
以上是小喆簡單的見解,關(guān)注上海喆圖公眾號,了解更多小知識。
詞條
詞條說明
? ? ? ?目前我國畜牧產(chǎn)業(yè)規(guī)模在不斷擴大,在此背景下,利用人工氣候培養(yǎng)箱加?強牧草培育,實現(xiàn)規(guī)?;N植也是十分有必要的。而在牧草品種中,“皇竹草"被譽為多功能牧草,該牧草是由象草與美洲狼尾草雜交育成的高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)牧草,其根系發(fā)達,葉質(zhì)柔嫩多汁,營養(yǎng)**高,適口性廣,產(chǎn)量高,再生能力強,是各類畜、禽、魚等的較佳飼料。而且種植皇竹草投資少,見效快,保水
? 恒溫培養(yǎng)箱由于其出色的溫控環(huán)境及完善的性能,已經(jīng)成為培養(yǎng)一些細胞菌類的*。那么我們?nèi)绾卧诿鎸κ袌錾霞妬y復雜的品牌型號中選擇到一款適合我們自己的恒溫培養(yǎng)箱呢?下面我們來談?wù)労銣嘏囵B(yǎng)箱的一些重要參數(shù)。? 1、恒溫培養(yǎng)箱的溫度范圍在我們培養(yǎng)一些細胞樣品的時候,首先要考慮的便是我們希望該樣品在怎樣的溫度狀況下進行培養(yǎng)。一般來說,溫度范圍在20-60℃為宜。大多數(shù)細胞培養(yǎng)在33℃左右
? ? ? ?二氧化碳培養(yǎng)箱,又稱細胞培養(yǎng)箱,喆圖ZCQ、ZCW系列二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,要求穩(wěn)定的溫度37℃、穩(wěn)定的CO2水平5%、較高的相對飽和濕度(95%)來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種儀器。二氧化碳培養(yǎng)箱是開展*學、學、遺傳學及生物工程所必需的關(guān)鍵設(shè)備,廣泛應(yīng)用于細胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生
? 菌種恒溫恒濕培養(yǎng)箱:也稱種子制備,意思是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。菌種的培養(yǎng)我們可以選擇恒溫恒濕培養(yǎng)箱,來達到溫度和濕度在一臺機器上就可以完成,不需要購買兩臺或以上。? 保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在恒溫恒濕培養(yǎng)箱中25℃(或較
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