使用細胞計數(shù)器的三個tip
市場上近幾年涌現(xiàn)出不少自動細胞計數(shù)器。這種儀器利用光學(xué)顯微鏡技術(shù),但帶來了高的準確性、重復(fù)性,并將這一單調(diào)的工作自動化。樣品體積小也是這種細胞計數(shù)器的額外優(yōu)勢。許多儀器使用一次性的玻片,只需要10-20 uL樣品。將玻片插入自動細胞計數(shù)器中,照相機捕獲圖像。隨后內(nèi)置的軟件分析圖像,顯示細胞數(shù)量等信息。
在此,介紹了使用自動細胞計數(shù)器的三個tip。
準確對焦
與其他光學(xué)顯微鏡一樣,儀器的準確對焦對于計數(shù)很關(guān)鍵。在手動計數(shù)時,訓(xùn)練有素的大腦可輕松鑒定細胞。然而,自動細胞計數(shù)器內(nèi)的照相機檢測活細胞的亮和暗邊緣,將其處理成黑白像素信息。如果細胞未準確對焦,那么亮將有明顯的灰度,會被誤認為是死細胞。
大部分研究人員將會發(fā)現(xiàn)對焦并不難,只要顯示在屏幕上的圖像質(zhì)量與傳統(tǒng)的顯微鏡相似。確保你有一張清晰的圖像,這很重要。另一點是要了解細胞計數(shù)器中照相機的分辨率。如果自動細胞計數(shù)器以低的幀速顯示,如每秒小于15幀,那么顯示的圖像將不能實時響應(yīng)聚焦旋鈕的微調(diào)。
控制玻片之間的差異
大部分基于圖像的自動細胞計數(shù)器都使用一次性的玻片,其上有明確的測量區(qū)域。這一測量區(qū)域被物鏡的放大率和照相機的圖像傳感器大小所設(shè)定。這些細胞計數(shù)器通常測定0.4-0.5 uL樣品,相當于血球計數(shù)器的4-5個大方格。
與血球計數(shù)器不同,計數(shù)玻片通常只使用一次。因此,玻片之間的差異會顯著影響細胞計數(shù)的結(jié)果。對于某一組實驗,好使用同一批號的玻片,盡量避免這些差異。在換批號時,也建議用標準的微珠來檢驗玻片。大部分細胞計數(shù)器制造商都提供已知濃度的標準微珠。使用相同的微珠樣品來檢驗不同的玻片,將有助于發(fā)現(xiàn)差異。
評估軟件的分簇性能
自動細胞計數(shù)器的是開展分析的軟件,它相當于手動計數(shù)時的人腦。大部分的自動細胞計數(shù)器包含集成軟件,能準確地計算單細胞群體的數(shù)量。然而,在談到成簇細胞的計數(shù)時,細胞計數(shù)器就會存在明顯差異。由于從培養(yǎng)細胞中獲得的樣品并不總是單細胞群體,因此,有時會有多個細胞團塊,而自動細胞計數(shù)器的分簇(declustering)性能也仔細評估。評估分簇性能時可開展圖1的檢測。
圖1. 將HL-60細胞加熱到70°C,處理20分鐘,細胞,獲得死細胞樣品。隨后利用兩款不同的自動細胞計數(shù)器進行樣品的檢測。在細胞計數(shù)之后,根據(jù)軟件捕獲的圖像進行比較。紅色圓圈:死細胞;藍色圓圈:活細胞;黑色圓圈:排除的對象。
自動細胞計數(shù)器正在取代單調(diào)乏味的手動計數(shù)方法。隨著對一些基本原理的了解,自動細胞計數(shù)器將幫助你獲得佳的結(jié)果。
詞條
詞條說明
1.通風(fēng)良好:在操作中為阻止一些蒸氣、氣體和微粒(煙霧、煤煙、灰塵和氣懸體)被載入儀器中影響實驗的性,需采用通風(fēng)櫥、通風(fēng)罩或局部通風(fēng)的方法操作,將污染物質(zhì)除去。2.不宜檢測高易燃物質(zhì):高易燃物質(zhì),如:石油醚,在高溫加熱試驗下易產(chǎn)生爆炸,因此,氮吹儀不宜檢測高易燃物質(zhì)。3.勿帶電打開水浴外殼:在實驗過程中,儀器帶電工作,以防水浴池里的物質(zhì)通狀況下發(fā)生漏電、觸電意外,發(fā)生危險,請勿帶電打開水浴外殼
集菌儀標準操作規(guī)程一、集菌儀操作步驟1、把儀器的蠕動泵柄和鉤松開,將培養(yǎng)器的軟管正確放入蠕動泵的定位槽內(nèi),鎖緊蠕動泵柄及鉤。2、在停止狀態(tài)時,按一下“RUN/STOP”鍵或踩動一下腳踏開關(guān),儀器即啟動,顯示屏上顯示儀器輸出轉(zhuǎn)速;而儀器的快慢,可根據(jù)需要在儀器工作時,通過“UP”、“DOWN”鍵“30R”、“60R”、“100R”“160R”“220R”檔位鍵隨時調(diào)整,有效轉(zhuǎn)速可達30rpm-220
大流量氫氣發(fā)生器如何才能達到本身預(yù)設(shè)的氫氣輸出壓力?
大流量氫氣發(fā)生器包括以下部件:具有可限定內(nèi)部空間且具有額定容積的燃料箱,該燃料箱配備有與內(nèi)部空間連通的氫排出口。包含儲氫材料并存儲在燃料箱中的催化劑,其中催化劑填充在催化反應(yīng)器中。反應(yīng)器配備有一個封閉部分,可用于阻止催化劑與燃料液體之間的接觸,而開放部分則與燃料液體接觸,因此可根據(jù)壓力的升高和降低而起作用。燃油箱調(diào)節(jié)是產(chǎn)生氫氣還是停止氫氣產(chǎn)生。那么它該如何才能達到本身預(yù)設(shè)的氫氣輸出壓力? 
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