厭氧培養(yǎng)箱是一種可在無氧環(huán)境下進行細菌培養(yǎng)及操作的裝置,可培養(yǎng)難生長的厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。
1. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置,應(yīng)避免陽光直曬和遠離采暖設(shè)備,放置平穩(wěn);
2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),并分別裝好減壓閥(含壓力表),安置在適當(dāng)位置;
3. 接上氣路并檢查氣路,為防止漏氣,必要時可在各接管處用密封膠粘合;
一、厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成:
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋;
2. 通電源開照明燈,開溫控儀,調(diào)節(jié)所需溫度及溫度;
3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉);
4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗;
5. 操作室內(nèi)次置換(氮氣置換):
A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一頭插入塑料袋;
B. 接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥1,使二只塑料袋充足氮氣,關(guān)閉閥門1,然后扎緊袋口;
C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;
D. 把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸放于操作室內(nèi),至全部放出。
6. 操作室二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。
7. 操作室三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)
A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進氣,充氣時取樣室先抽真空,并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣;
B. 混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣閥并打開閥5,使混合氣經(jīng)過流量計,調(diào)整流量計,流量為每分鐘10ml左右;
C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi);
D. 通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于微量狀態(tài)。
8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一小時后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變色情況,不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境;
9. 開紫外線滅菌燈,室內(nèi)進行滅菌處理,滅菌時間按具體實驗自定。
2、菌種的置入和培養(yǎng):
1. 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之;
2. 打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門;
3. 取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后人工打開氮氣閥2進氣,使指針回復(fù)零位,關(guān)掉閥2。二次重復(fù)操作一次。三次操作時,使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停,然后打開閥4進混合氣,使指針回復(fù)零位,后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束;
詞條
詞條說明
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