概念:
重組酶聚合酶擴(kuò)增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術(shù)。RPA技術(shù)主要依賴于三種酶:能結(jié)合單鏈核酸(寡核苷酸引物)的重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶。這三種酶的混合物在常溫下也有活性,較佳反應(yīng)溫度在37°C左右。
RPA技術(shù)原理:重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物,能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列,就會發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動DNA合成,對模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的DNA鏈與SSB結(jié)合,防止進(jìn)一步替換。在這個體系中,由兩個相對的引物起始一個合成事件。整個過程進(jìn)行得非???,一般可在十分鐘之內(nèi)獲得可檢出水平的擴(kuò)增產(chǎn)物。
詞條
詞條說明
RPA技術(shù)有哪些特性?能實(shí)現(xiàn)多重化嗎?
快速檢測 15min進(jìn)行單分子檢測試驗(yàn), 簡易包裝 穩(wěn)定凍干形式試劑. *熱循環(huán)過程 擺脫任何儀器束縛. 便攜 設(shè)備要求低,貧瘠條件亦能 完成檢測★RPA能實(shí)現(xiàn)多重化嗎?可以。RPA技術(shù)支持在同一個管中同時進(jìn)行多個擴(kuò)增反應(yīng)。不過,多重化的引物組合需要精心設(shè)計,以便每個引物都能同樣有效的工作。需要注意的是,RPA反應(yīng)的引物總量(nmol)較好不要**標(biāo)太多。如果在一個反應(yīng)中使用兩個以上的擴(kuò)增引物,就
應(yīng)用領(lǐng)域:廣泛應(yīng)用于食品檢測、動物健康、農(nóng)業(yè)、環(huán)境測試、生物防御、科學(xué)研究等領(lǐng)域。?主要特點(diǎn):◆輕便,易于攜帶,野外可以使用,續(xù)航時間長◆擴(kuò)增簡便易行,可實(shí)現(xiàn)單分子擴(kuò)增,操作簡便◆檢測靈敏度高,強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理能力◆機(jī)器自帶LCD觸屏視圖,清晰顯示,便于記錄?產(chǎn)品特性:◆適合于室內(nèi)臺式應(yīng)用和現(xiàn)場檢測應(yīng)用;◆標(biāo)準(zhǔn)的200ul八聯(lián)管孔道;◆支持重組酶聚合酶擴(kuò)增;◆磁力混勻RPA反應(yīng)體
TwistDx公司重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)(RPA)
TwistDx 的重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)將徹底改變在資源有限的現(xiàn)場環(huán)境中擴(kuò)增和檢測核酸的能力。RPA 技術(shù)原理RPA 體系的重點(diǎn)是重組酶,這些酶與寡核苷酸引物形成復(fù)合體,并使引物與雙鏈 DNA 中的同源序列配對。單鏈 DNA 結(jié)合(SSB)蛋白與被取代的 DNA 鏈結(jié)合,并使形成的 D 環(huán)保持穩(wěn)定。然后從引物啟動由聚合酶介導(dǎo)的 DNA 擴(kuò)增,但前提是存在靶標(biāo)序列。一旦啟動,擴(kuò)增反應(yīng)將快速進(jìn)行,
它采用的主要是反滲透膜技術(shù)。它的工作原理是對水施加一定的壓力,使水分子和離子態(tài)的礦物質(zhì)元素通過反滲透膜,而溶解在水中的絕大部分無機(jī)鹽(包括重金屬),**物以及細(xì)菌、病毒等無法透過反滲透膜,從而使?jié)B透過的純凈水和無法滲透過的濃縮水嚴(yán)格的分開,反滲透膜上的孔徑只有0.0001 微米,而病毒的直徑一般有0.02-0.4微米,普通細(xì)菌的直徑有0.4-1微米,水機(jī)不僅可以將雜質(zhì)、鐵銹、膠體、細(xì)菌、病毒驅(qū)除掉
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