如何制備HEPES緩沖液?這里有多種方法!

    Hepes是一種通用的兩性離子緩沖劑,不結(jié)合,鈣,錳或銅離子。其中細胞培養(yǎng)應用的緩沖液強度通常在10至25mm之間,在加入Hepes后,用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH。必須注意保持培養(yǎng)基中的重量克分子滲透壓濃度,并且需要評估對于給定細胞系的毒性。根據(jù)文獻得到,HEPES在控制pH方面**碳酸。
    Hepes的緩沖液可以通過好幾種方法來制備,可以將游離酸添加到水中,然后用大約一半摩爾當量的或滴定至所需的pH。或者,相等摩爾濃度的Hepes和Hepes鹽,可以將它們以大約相等的體積混合,然后用任一種溶液反滴定至合適的pH。可以用HCL滴定鹽,得到一半當量的氯化。但是,離子強度的增加會改變?nèi)芤旱闹亓靠朔肿訚B透壓濃度。Hepes半的大多數(shù)溶液都會溶解在水中,形成pH值7.5,幾乎不用做調(diào)整。
    Hepes緩沖鹽水(2X)的倆種配方:
    1、氯化1.6克
    氯化0.074克
    Na2HPO4二水合物0.027克
    葡萄糖0.2克
    HEPES,游離酸1克
    將上述成分溶解在總體積為90毫升的蒸餾水中,用0.5 N NaOH調(diào)節(jié)pH到7.05,然后調(diào)節(jié)用蒸餾水定容至100毫升。通過0.22微米的過濾器對溶液進行滅菌,分裝在-20°C下。
    2、氯化16.4克
    HEPES,游離酸11.9 g
    Na2HPO4 0.21克
    水 1升
    加入上述成分并攪拌直至溶解,用5 M NaOH滴定至pH 7.05(準確的pH值非常重要),篩選消毒。
    在與轉(zhuǎn)染實驗一起使用之前測試制劑,通過將0.5 ml的上述緩沖液與0.5 ml的250 mM CaCl2混合并渦旋進行測試。應形成細的沉淀物,該沉淀物在顯微鏡下很*看到。如果沒有形成沉淀,不要將這批緩沖液用于轉(zhuǎn)染實驗。
    綜上所述,便是我司提供的Hepes緩沖液的制備方法,希望這些信息可以幫到大家。當然,如有采購生物緩沖液可聯(lián)系我司,湖北新德晟材料有限公司專業(yè)生產(chǎn)Tris、Hepes、Mops等緩沖劑產(chǎn)品。截至目前公司也成立數(shù)十年,對生物緩沖劑的研發(fā)生產(chǎn)有著十分豐富的經(jīng)驗。可以大量提供Hepes以及生物緩沖劑的其他型號產(chǎn)品,并且我司可為客戶進行產(chǎn)品定制和專業(yè)售后服務,并可為特殊客戶進行專業(yè)的產(chǎn)品樣品測試服務與包裝定制服務。

    武漢德晟生化科技有限公司專注于真空采血管添加劑,體外診斷試劑,抗凝劑,緩沖劑,肝素,血清分離膠等

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    詞條說明

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