電極中三(羥甲基)氨基甲烷(Tris)的作用

    Tris 或三(羥),已被廣泛用作生物介質(zhì)中的pH緩沖液大約35年。這種生物緩沖液的近乎理想的特性是其受歡迎的原因。Tris不吸水,易溶于水,純度高。它不會沉淀鈣鹽,在室溫下在溶液中穩(wěn)定數(shù)月,并且似乎不會抑制許多酶系統(tǒng)。但是,Tris 緩沖液的化學和物理特性,使用不當可能會導致錯誤的pH測量的電極系統(tǒng)。
    TRIS緩沖液中pH對電極的影響
    生物化學家使用TRIS緩沖液將pH值控制在生理范圍內(nèi)(約7至8pH值),因為鹽會導致與測試樣品中的生物物質(zhì)發(fā)生不良反應。然而,當要對這些溶液進行pH測量時,必須認識到另一種類型的“不良副反應”,涉及pH電極系統(tǒng)。
    Tris緩沖液的化學和物理特性對pH值的影響
    常用于生理測量(pH7至7.5)的pH范圍內(nèi)的tris沒有大的緩沖能力。因此,在使用tris緩沖液控制樣品pH值時應謹慎行事。tris相當大的溫度系數(shù)(-0.028pH/°C)也值得考慮。例如,如果使用tris緩沖液對儀表進行標定,并且tris溫度為20°C,則使用25°C的pH值會導致誤差。所以,在使用tris進行標準化時必須使用溫度pH相關(guān)性。當使用tris控制樣品的pH值時,控制程度將取決于樣品溫度。如果樣品溫度變化2°C,pH控制變化約0.06個pH單位。所需的pH值控制將決定允許的zui大溫度波動。
    Tris緩沖液的優(yōu)點
    ① 因為Tris堿的堿性較強,所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液;
    ② 對生物化學過程干擾很小,不與鈣、離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。 
    Tris緩沖液的缺點
    ① 緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1;Tris緩沖液應使用不含CO2的蒸餾水或去離子水由高純度的tris和HCl制備。
    ② 溫度效應大,溫度變化對緩沖液pH值的影響很大,所以一定要在使用溫度下進行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃;
    ③ 易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴密封;
    ④ 此緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定干擾作用,所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。
    

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