當(dāng)疫情再一次伺機(jī)而動(dòng)時(shí),要想快速的控制病毒的傳播,做核酸檢測(cè)就成了必經(jīng)之路,同時(shí)也備受各界關(guān)注。但影響核酸檢測(cè)結(jié)果的因素是多種多樣的,包括樣本采集部位、采集方式、儲(chǔ)運(yùn)過(guò)程、核酸提取操作等等。其中,樣本的穩(wěn)定性是一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。如何能使病毒快速失活,又能保護(hù)病毒核酸不被降解,維持檢測(cè)穩(wěn)定性的病毒樣本保存液就成了重中之重。
第一步:打破外殼,消滅“戰(zhàn)斗力”
和其他RNA病毒一樣,新冠病毒的結(jié)果簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),是由蛋白質(zhì)外殼包裹著單鏈核酸——RNA構(gòu)成的。我們可以簡(jiǎn)單地將病毒的RNA視為發(fā)號(hào)施令的“大腦”,蛋白質(zhì)則是執(zhí)行命令的“四肢”。新冠病毒感染人體并發(fā)生繁殖活動(dòng),引發(fā)病癥,這個(gè)過(guò)程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白結(jié)構(gòu)完成。
滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒;它是一種強(qiáng)有力的蛋白質(zhì)變性劑,能迅速溶解蛋白質(zhì),導(dǎo)致病毒結(jié)構(gòu)破碎。當(dāng)帶有新冠病毒的臨床樣本與保存液混合,樣本中的病毒受裂解液作用,蛋白質(zhì)外殼被迅速破壞,并且這種破壞是不可復(fù)原的。這時(shí)候,病毒就失去了作惡的“爪牙”,不再擁有對(duì)人的感染能力,從而**了樣本運(yùn)輸、處理過(guò)程中接觸者的安全。
第二步:抑制酶活,押送“身份證”
外殼裂解后,新冠病毒的RNA游離在保存液當(dāng)中。作為單鏈大分子,RNA的穩(wěn)定性不像雙鏈的DNA那樣巋然不動(dòng),在自然環(huán)境中隨處存在的RNA酶便是使RNA水解斷裂的罪魁禍?zhǔn)住R虼?,通常認(rèn)為失去外殼保護(hù)的病毒RNA是脆弱、不穩(wěn)定的,需要低溫儲(chǔ)存才能保證它的完整性。
第三步:配合提取,確認(rèn)“真兇”
病毒RNA妥善地儲(chǔ)存在病毒樣本保存液中,在進(jìn)行檢測(cè)前,還需要最后一個(gè)步驟:將保存液中的RNA捕捉、濃縮,作為較終樣本加入實(shí)時(shí)熒光PCR體系中,上機(jī)進(jìn)行檢測(cè)。
德晟生產(chǎn)的病毒保存液除了滅活型病毒保存液外,還有非滅活型病毒保存液。它是同時(shí)保留病毒的蛋白質(zhì)外殼和病毒核酸DNA或者是RNA,這樣病毒在體外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性,當(dāng)然操作失誤時(shí)也有一定的感染性風(fēng)險(xiǎn)。采樣后長(zhǎng)時(shí)間保存需要保持嚴(yán)格低溫。不管是哪種病毒保存液,我們?cè)谑褂脮r(shí)都需要按照要求嚴(yán)格操作、存放或運(yùn)輸。
詞條
詞條說(shuō)明
血跡檢驗(yàn)是刑事案件中較常見(jiàn)的法醫(yī)物證檢驗(yàn)之一,血跡顯色劑用于快速檢測(cè)案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)的潛在血漬、血指紋、血手印等,可為快速還原案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)、案件偵查等提供重要的線索和依據(jù)。常見(jiàn)的血跡顯色劑有TMB、魯米諾等,它們是法醫(yī)檢驗(yàn)、取證的得力助手,今天我們就來(lái)介紹下用于刑偵的魯米諾反應(yīng)。什么是魯米諾反應(yīng)魯米諾,又名發(fā)光氨,CAS號(hào):521-31-3。魯米諾可與多種氧化劑發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng),具有較高的發(fā)光**產(chǎn)率和較好的
碳酸因能抑制去甲腎上腺素(NA)的釋放,促進(jìn)神經(jīng)末梢對(duì)其攝取,降低突觸間隙NA的含量,而用于控制躁狂癥狀。但是臨床上使用碳酸也有許多不良反應(yīng),蓄積中毒時(shí)可以出現(xiàn)腦病綜合征、昏迷、休克、腎功能損害等。因?yàn)殡x子(Li+)從細(xì)胞內(nèi)排出較慢,所以一旦中毒,持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),由此引起的死亡也屢見(jiàn)不鮮。因此臨床上必須經(jīng)常監(jiān)測(cè)Li+濃度,以防止中毒現(xiàn)象的發(fā)生。近年來(lái)真空采血系統(tǒng)的普遍應(yīng)用,特別是一些添加劑的處
TRIS三羥甲基氨基甲烷,常用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中緩沖液的制備,因?yàn)樗且环N應(yīng)用非常廣泛的**試劑。它的有效緩沖范圍在PH7.0到9.2之間,在生化實(shí)驗(yàn)中,許多蛋白質(zhì)及核酸相關(guān)的實(shí)驗(yàn)都需要用TRIS作為生物緩沖劑,它甚至有**過(guò)磷酸鹽的趨勢(shì)。除此之外還可用于制作藥物、**合成、化妝品添加劑等領(lǐng)域。除此之外TRIS的衍生緩沖液種類也很多,功能強(qiáng)大。今天我們主要來(lái)了解一下TRIS衍生物 TE、T
病毒的檢測(cè)不同于常規(guī)的生化檢測(cè),病毒本身是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的微生物,必須寄生在活細(xì)胞內(nèi)。采樣后,病毒離開(kāi)寄主細(xì)胞,在采樣管內(nèi)其蛋白質(zhì)外殼和核酸都會(huì)很快降解,這樣核酸檢測(cè)時(shí)就無(wú)法判斷初始采集的樣本是否含有病毒,容易造成假陰性。所以我們要使用病毒保存液防止病毒的降解;同時(shí)還要防止病毒保存液長(zhǎng)霉菌的現(xiàn)象出現(xiàn)。1、滅活病毒保存液當(dāng)前核酸檢測(cè)是對(duì)樣本中的病毒RNA進(jìn)行檢測(cè),需要將病毒裂解,所以只要能保證病毒核酸
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