【病原微生物檢測】

時間：2021-04-08

1 傳統(tǒng)的病原微生物的檢測方法

傳統(tǒng)的病原微生物學實驗室檢查以染色、培養(yǎng)、生化鑒定等為主，將標本直接涂片染色鏡檢和接種在培養(yǎng)基上進行分離培養(yǎng)是對細菌或真菌感染性疾病進行病原學診斷的常用方法。

1．1 直接涂片鏡檢病原微生物體形體積微小，大多無色半透明狀，將其染色后可借助顯微鏡觀察其大小、形態(tài)、排列等。直接涂片染色鏡檢簡便快速，對那些具有特殊形態(tài)的病原微生物感染仍然適用，例如淋球菌感染、結核分枝桿菌、螺旋體感染等的早期初步診斷。直接涂片鏡檢不需要特殊的儀器和設備，在基層實驗室里仍然是十分重要的病原微生物檢測手段。

1．2 分離培養(yǎng)與生化反應分離培養(yǎng)主要用于臨床標本(如血液、痰、糞便等)或培養(yǎng)物中有多種細菌時對某一種細菌的分離。細菌的生長繁殖需要一定時間，檢測周期較長，不能同時處理批量樣本。為解決這一問題，各種自動化培養(yǎng)和鑒定系統(tǒng)不斷產生，傳統(tǒng)鑒定方法也在逐步改進，大大加快了檢驗速度。養(yǎng)菌如肺炎鏈球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血桿菌等對營養(yǎng)要求比較高，常規(guī)培養(yǎng)陽性率低。將不要同比例的葡萄糖、玉米淀粉、生長因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌劑加入到巧克力培養(yǎng)基中制成了新型淋病奈瑟菌培養(yǎng)基，大大提高了淋病奈瑟菌的分離培養(yǎng)率。

1．3 組織細胞培養(yǎng)活組織細胞培養(yǎng)適于專營活組織細胞內生存的病原體，包括病毒、立克次體、衣原體等。不同病原體敏感的組織細胞是不一樣的，將活細胞從病原體敏感的動物組織中取出在體外進行原代培養(yǎng)或用病原體敏感細胞系進行傳代培養(yǎng)，再將病原體接種于相應的組織細胞中后，病原體可在其中繁殖增長，引起特異性的細胞病變效應。也可以將病原體直接接種于敏感動物體內，引起相應組織器官出現特異的病理學改變。往往可以根據這些特異的病變對病原體進行鑒定。

2 血清學與學檢測

血清學檢測是通過已知的抗體或抗原來檢測病原體的抗原或抗體從而對病原體進行快速鑒定的技術，簡化了鑒定步驟，常用的方法包括血清凝集技術、乳膠凝集實驗、熒光抗體檢測技術、協(xié)同凝集試驗、酶聯(lián)測試技術等。酶聯(lián)技術的應用大大提高了血清學檢測的敏感性和特異性，不僅可檢測樣本中病原體抗原，也可檢測機體的抗體成分。幽門螺奸菌在我國人群感染率高達50％～80％，應用酶聯(lián)吸附法(ELISA)檢測唾液中抗HP抗體來診斷HP感染，其結果滿意。乙型肝炎病毒(HBV)在我國人群中感染率較高，ELISA應用于乙型肝炎病人早期血清學診斷的效果為明顯。

臨床上致病菌往往和非致病菌混合在一起，如何從這些細菌中分離出目標菌是關鍵。磁珠分離技術(IMBS)是近年來發(fā)展起來的在微生物檢測領域中一種新技術。其基本原理是將特定病原體的單抗或多抗或二抗偶聯(lián)到磁珠微球上，通過抗原抗體反應形成磁珠一目標病原體復合物或磁珠一一抗一目標病原體復合物，在外部磁場磁力的作用下，將目標病原體分離出來。目前已經開發(fā)出了針對各種病原體的磁珠，如大腸埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、軍團菌等，廣泛應用到各級科研和實驗室。經IMBS分離出的白色念珠菌可直接在顯微鏡下檢測，檢測時間縮短至4 h。IM—Bs還可以和其它檢測技術聯(lián)合來檢測病原菌，磁珠分離得到的目標菌可繼續(xù)用于分離培養(yǎng)使大腸埃希菌0157低檢測限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g～；IMBS結合聚合酶鏈反應(IMBS—PCR)可對培養(yǎng)條件比較特殊的細菌如苛養(yǎng)菌、厭氧菌進行快速檢測，肉類中的產毒素型產氣莢膜梭菌經IMBS．PCR檢測，檢測時間縮短到10 h，低檢測限可達10cfu·g～，有研究者利用IMBS結合實時熒光定量PCR(IMBS—RT—PCR)成功檢測出了水中的輪狀病毒和草莓的諾如病毒，檢測時間大大縮短；Leon—Velarde等利用IMB8結合酶聯(lián)檢測，大大提高了沙門菌的檢測效率。

3 基因檢測

隨著科技水平發(fā)展，分子生物學檢測技術日新月異，對病原微生物的鑒定已不再局限于對普通外部形態(tài)結構和生理生化特性等的一般檢驗上，而是深入到了分子水平、核酸水平。病原微生物的核酸序列即基因片段都是特異的，有別于其他種或屬，檢測其特有的基因片段序列可用來鑒別病原微生物。隨著科技的發(fā)展，基因檢測技術逐漸代替其它檢測技術，成為臨床檢驗科和基礎實驗室對病原體的主流檢測技術。

19128621950

詞條
詞條說明
【食品檢測】食品安全檢測的檢測技術
色譜技術色譜技術實質上是一種物理化學分離方法，即當兩相作相對運動時，由于不同的物質在兩相(?固定相和流動相)中具有不同的分配系數(或吸附系數)，通過不斷分配(?即組分在兩相之間進行反復多次的溶解、揮發(fā)或吸附、脫附過程)?從而達到各物質被分離的目的。色譜技術已經發(fā)展成熟，具有檢測靈敏度高、分離效能高、選擇性高、檢出限低、樣品用量少、方便快捷等優(yōu)點，已被廣泛應用于食品工業(yè)
【食品檢測】新版《食品檢驗工作規(guī)范》的特點
新版《食品檢驗工作規(guī)范》(食藥監(jiān)科[2016]170號)共七章43條，本《規(guī)范》的制定充分借鑒了原衛(wèi)生部配合2009版《食品安全法》印發(fā)的《食品檢驗工作規(guī)范》(衛(wèi)監(jiān)督發(fā)[2010]29號)，與之相比較，本《規(guī)范》根據當前食品安全監(jiān)管需求和食品檢驗工作發(fā)展狀況做了針對性的調整、修改和補充，尤其是對檢驗機構的誠信要求、社會責任、檢驗過程控制、質量管理以及檢驗記錄信息完整可追溯等方面的要求做了進-步的強
【*原性分析檢測】*原性化學基礎
*原性是指能引起*應答的性能，即抗原能刺激特定的*細胞，使*細胞活化、?增殖、分化，較終產生*效應物質抗體和致敏淋巴細胞的特性。許多**物質可誘導*應答，其*分子蛋白質和多糖具有強*原性，小分子多肽及核酸也具有*原性?；瘜W組成大分子蛋白質，分子量大于10000者，可含有大量不同的抗原決定簇，是較強的*原。如異種血清蛋白、酶蛋白及細菌毒等，是強*原蛋白質的例子。多糖是
【*原性分析檢測】
*原性檢測的的標準有8條**標準分類中，*原性檢測的涉及到食品綜合、食品試驗和分析的一般方法。在中標準準分類中，*原性檢測的涉及到基礎標準與通用方法、食品加工與制品綜合、食品衛(wèi)生、標準化、質量管理、衛(wèi)生檢疫。行業(yè)標準-商品檢驗，關于*原性檢測的的標準SN/T 4058-2014?出口動物源性食品中玉米赤霉醇類殘留量的檢測方法 *親和柱凈化-HPLC和LC-MS/MS法SN/T