如何處理高鹽分土樣

時(shí)間：2014-12-19作者：深圳市安必勝科技有限公司瀏覽：189

作者：Michelle Tetreault Carlson 來(lái)源：美國(guó)MoBio實(shí)驗(yàn)室【字號(hào)：大 中 小】

MO BIO技術(shù)部：

我在使用RNA Power Soil Total RNA Isolation kit處理一些高鹽含量的土壤樣品，結(jié)果提取出來(lái)的全是DNA而不是RNA，這是怎么回事呢？

Thao：

您好!

提取含鹽量高的土壤或其它類(lèi)型樣品需要些技巧。RNA PowerSoil Total RNA Isolation kit(貨號(hào)：12866-25）使用的是陰離子交換樹(shù)脂來(lái)吸附和洗滌核酸。在低鹽條件下，帶負(fù)電荷的RNA/DNA被牢牢吸附綁定在帶正電荷的樹(shù)脂上。高鹽條件下，它們彼此的極性會(huì)被掩蓋。通過(guò)調(diào)節(jié)離心柱所使用緩沖液的鹽濃度可控制RNA或DNA的洗脫。逐漸提高鹽濃度的過(guò)程中，先洗脫下來(lái)的是RNA，然后洗脫DNA。然而，如果處理的是高鹽含量的土樣，會(huì)改變樹(shù)脂所處的緩沖環(huán)境，這就是你現(xiàn)在面臨的狀況。土樣中殘留的過(guò)高鹽分導(dǎo)致較終洗脫下來(lái)的是DNA而非RNA。

為了去除這些起干擾作用的鹽份，可以對(duì)土樣進(jìn)行洗滌。把樣品加入到15ml滅菌收集管中，再加入10ml滅菌PBS，短暫渦旋混勻，10,000 x g離心2min，棄上清。這樣重復(fù)洗滌3次，效果會(huì)好很多。

祝好!

MO BIO 技術(shù)

附

金屬含量高的土樣也會(huì)影響試劑盒的提取效果，我們建議使用滅菌的TE緩沖液（10 mM Tris, 1 mM EDTA）對(duì)這種類(lèi)型的土壤進(jìn)行重復(fù)洗滌。在此，EDTA可起到螯合金屬離子的作用。操作同上，將TE緩沖液和樣品都加入到收集管內(nèi)，渦旋混勻，然后離心沉淀細(xì)胞和土壤顆粒，棄去上清，根據(jù)實(shí)際需要可以多洗幾遍。


深圳市安必勝科技有限公司專(zhuān)注于試劑盒 實(shí)驗(yàn)室耗材等

• 詞條

  詞條說(shuō)明

• 絲狀真菌叢枝菌

  來(lái)源：深圳市安必勝科技有限公司 轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處 MOBIO的技術(shù)團(tuán)隊(duì)參加了芝加哥舉行的*四屆阿爾貢土壤宏基因組學(xué)會(huì)議，其中較熱的話題就是絲狀真菌。技術(shù)部的熱線響個(gè)不停，來(lái)電有許多咨詢?nèi)绾翁崛〗z狀真菌DNA和RNA，貌似全宇宙都在關(guān)心絲狀真菌。所以很值得在技術(shù)文章里頭占一篇只之地。 真菌是種很有趣的微生物。有哪個(gè)物種的大小既能是一個(gè)細(xì)胞，也能長(zhǎng)到迄今為止已知地球上較大的生物體，足足占地4平方英里（

• 如何讓珠磨研磨管發(fā)揮較大研磨效率

  作者：Michelle Tetreault Carlson 來(lái)源：美國(guó)MoBio實(shí)驗(yàn)室 **的珠磨研磨設(shè)備如此的昂貴。一次容納數(shù)數(shù)個(gè)研磨管的設(shè)備動(dòng)輒幾千美元。幸好，還有便宜簡(jiǎn)單又多用途的渦旋儀可選，能滿足大多的數(shù)珠磨研磨應(yīng)用需要。為獲得較佳使用效果，我們推薦你使用Tube管水平放置的渦旋儀適配器，高效均一地均質(zhì)化你的樣品。MOBIO供應(yīng)適合2ml~50ml大小不等Tube管的系列適配器。 我們大

• 探索地下微生物世界：尋找新的抗生素

  作者：Suzanne kennedy 來(lái)源：美國(guó)MoBio實(shí)驗(yàn)室 這個(gè)月我們采訪了明尼蘇達(dá)州州立大學(xué)藥物設(shè)計(jì)中心副教授Dr. Christine Salomon。 Dr. Salomon專(zhuān)注于化學(xué)與微生物生態(tài)學(xué)交叉領(lǐng)域，尋找具有長(zhǎng)遠(yuǎn)開(kāi)發(fā)應(yīng)用潛力的新發(fā)現(xiàn)代謝產(chǎn)物。當(dāng)花費(fèi)大量經(jīng)歷研究地球表面生物，我們對(duì)地底下的生物世界卻知之甚少。Dr. Salomon調(diào)查研究了位于明尼蘇達(dá)州北邊的蘇丹礦山深入地下半

• 如何處理高鹽分土樣

  作者：Michelle Tetreault Carlson 來(lái)源：美國(guó)MoBio實(shí)驗(yàn)室【字號(hào)：大 中 小】 MO BIO技術(shù)部： 我在使用RNA Power Soil Total RNA Isolation kit處理一些高鹽含量的土壤樣品，結(jié)果提取出來(lái)的全是DNA而不是RNA，這是怎么回事呢？ Thao： 您好! 提取含鹽量高的土壤或其它類(lèi)型樣品需要些技巧。RNA PowerSoil Tota