去除重鏈輕鏈干擾：只要一招快速解決你的煩惱

時(shí)間：2016-12-02作者：武漢艾美捷科技有限公司瀏覽：44

    在*沉淀試驗(yàn)后的WB驗(yàn)證環(huán)節(jié)中，二抗的選擇往往可以避免經(jīng)常出現(xiàn)的重鏈輕鏈的干擾原因，當(dāng)使用常規(guī)的Anti-lgG(H+L)酶標(biāo)二抗時(shí)，通常會(huì)出現(xiàn)對(duì)應(yīng)*沉淀一看的重鏈（55kDa）和輕鏈（30kDa）的兩條帶。如果檢測(cè)的目的蛋白分子量在55kDa或者30kDa附近時(shí)，就會(huì)收到這兩條帶的干擾。針對(duì)這種情況，艾美捷推薦兩種二抗解決方案：

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• 去除重鏈輕鏈干擾：只要一招快速解決你的煩惱

  在*沉淀試驗(yàn)后的WB驗(yàn)證環(huán)節(jié)中，二抗的選擇往往可以避免經(jīng)常出現(xiàn)的重鏈輕鏈的干擾原因，當(dāng)使用常規(guī)的Anti-lgG(H+L)酶標(biāo)二抗時(shí)，通常會(huì)出現(xiàn)對(duì)應(yīng)*沉淀一看的重鏈（55kDa）和輕鏈（30kDa）的兩條帶。如果檢測(cè)的目的蛋白分子量在55kDa或者30kDa附近時(shí)，就會(huì)收到這兩條帶的干擾。針對(duì)這種情況，艾美捷推薦兩種二抗解決方案： 一種是在IP和WB實(shí)驗(yàn)中使用相同的抗體，可以通過(guò)蛋白質(zhì)分子量

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• IPKine：*沉淀消除輕鏈干擾的特異性二抗

  在*沉淀(Immunoprecipitation, IP)和*共沉淀(co-Immunoprecipitation, co-IP) 實(shí)驗(yàn)中，IP和WB的操作過(guò)程中通常會(huì)用到相同的一抗或同種屬來(lái)源的一抗，這種情況下，如果使用常規(guī)的Anti-IgG（H+L）酶標(biāo)二抗，WB實(shí)驗(yàn)中IP抗體變性后產(chǎn)生的重鏈（55kDa）和輕鏈（25kDa）都能夠識(shí)別，而此非特異的信號(hào)往往會(huì)部分甚至完全掩蓋目的蛋白的信