His標(biāo)簽是由6個(gè)組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白質(zhì)的吸附純化。由于分子量較小,并且較*分離和純化,His-tag 融合標(biāo)簽與其他標(biāo)簽相比有很多明顯優(yōu)勢(shì), 是目前用于純化的融合標(biāo)簽中使用較為廣泛的一種。His抗體可以用于檢測(cè)和His標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測(cè)His融合表達(dá)蛋白等。然而,目前商品化His 蛋白三維結(jié)構(gòu)圖His-tag的單克隆抗體(mAb)種類不多, 且價(jià)格也十分昂貴。 如何選擇合適的His標(biāo)簽抗體? 我們?cè)谶x擇His抗體時(shí),主要根據(jù)自己的需要,特別是實(shí)驗(yàn)應(yīng)用上的需要。其中需要考慮的因素包括了,His抗體的應(yīng)用檢測(cè)類型、His抗體的克隆性及制備來(lái)源等。比如該His抗體是否能用于Western Bloting的檢測(cè)?是否可以用于*熒光IF實(shí)驗(yàn)?我是否需要特異性較好的單克隆His標(biāo)簽抗體?我是否需要考慮下是選擇小鼠來(lái)源的還是兔來(lái)源的His抗體? 之前有使用SSS(一家著名品牌的His標(biāo)簽抗體,名稱隱去)的His標(biāo)簽抗體,一開始還好,過(guò)了半年后,就發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定,做IF實(shí)驗(yàn)不行了,后來(lái)試用了下Abbkine的,IF結(jié)果很漂亮,順帶還買了他們的DyLight熒光二抗 —— 廣州南方醫(yī)科大學(xué)一客戶 一般來(lái)說(shuō),應(yīng)用類型越多,在使用過(guò)程中的選擇余地就越大,而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩(wěn)定性以及效價(jià)都要**多克隆抗體。 另外,抗體的效價(jià)也是考察該抗體性價(jià)比的重要方面,也即相當(dāng)于實(shí)際應(yīng)用時(shí)的稀釋比率。一個(gè)效**的100μl His抗體(假如其WB檢測(cè)的稀釋比率是1:5,000,較終使用液相當(dāng)于500ml),要比效價(jià)低的1ml的His抗體(假如WB檢測(cè)的稀釋比率是 1:200,較終使用液相當(dāng)于2ml)性價(jià)比較高。因此在選擇抗體的時(shí)候,不但需要考慮抗體的量,還需要考慮抗體的效價(jià),即不同應(yīng)用的建議稀釋比率。 Abbkine His標(biāo)簽抗體 產(chǎn)品名稱及描述 品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品詳情 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 詳情 HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02055 詳情 Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02051 詳情 為什么推薦Abbkine品牌的His抗體? 供應(yīng)His抗體的進(jìn)口品牌有很多,包括Sigma、Novagen、Qiagen、Abcam等,其中Abcam有一款值得推薦的His抗體,品名為6X His tag? antibodyab18184-6X His tag? antibody [HIS.H8] ——Abcam His抗體 [HIS.H8] (貨號(hào)為:ab18184),該抗體是Abcam推薦的一5星級(jí)His標(biāo)簽抗體,可用于IF/ICC、IP以及WB實(shí)驗(yàn),截止到2013年,使用該抗體發(fā)表在NCBI統(tǒng)計(jì)的文章有16篇(詳情請(qǐng)點(diǎn)擊:6X His tag? antibody [HIS.H8])。該抗體為單克隆抗體,克隆號(hào)為HIS.H8,該抗體2013年的中國(guó)報(bào)價(jià)為¥4418/100μl。Abcam的抗體在品牌**度、質(zhì)量以及售后方面都是很值得推薦的,然后其價(jià)格較高。 在此,我們向您推薦Abbkine的His標(biāo)簽抗體,Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3)(貨號(hào)A02050),該抗體實(shí)際上與上述Abcam抗體來(lái)源相同。與Abcam一樣,其*原是6x His合成多肽,可識(shí)別可識(shí)別His重組蛋白和在細(xì)胞內(nèi)過(guò)表達(dá)的His標(biāo)記重組蛋白。然而其價(jià)格比Abcam低65%以上。Abbkine作為美國(guó)一家生產(chǎn)型品牌,為多個(gè)****品牌提供OEM服務(wù),因此其價(jià)格低廉,其質(zhì)量也經(jīng)受過(guò)市場(chǎng)檢驗(yàn)。該抗體可以用于Western Bloting、*細(xì)胞化學(xué)及*熒光ICC/IF和*沉淀IP實(shí)驗(yàn)等多種不同應(yīng)用。 Abbkine His標(biāo)簽抗體 產(chǎn)品名稱及描述 品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品詳情 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 詳情 HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02055 詳情 Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02051 詳情 [nggallery id=3] 點(diǎn)擊圖片查看相關(guān)信息和大圖顯示 一個(gè)高效價(jià)的抗體不僅影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的靈敏度,還意味著較高的性價(jià)比。Abbkine的His標(biāo)簽抗體在常規(guī)的WB實(shí)驗(yàn)里,推薦的起始稀釋比率為1:1000,實(shí)際在Abbkine的應(yīng)用中,還有1:4,000甚至較高的稀釋比率,需要根據(jù)客戶具體的實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。該抗體在*細(xì)胞化學(xué)及*熒光ICC/IF中同樣表現(xiàn)優(yōu)秀,5C3克隆的His標(biāo)簽抗體識(shí)別的*決定簇非常適合ICC/IF的應(yīng)用。IP*沉淀反應(yīng)也是客戶選擇Abbkine的一個(gè)重要原因。另外,Abbkine還同時(shí)提供經(jīng)HRP偶聯(lián)的His標(biāo)簽抗體,尤其適合IP-WB驗(yàn)證時(shí)去除二抗的干擾;兔源多克隆His抗體也為客戶提供另一種His標(biāo)簽的檢測(cè)方案。 Abbkine還提供大包裝1ml的His標(biāo)簽抗體,非常適合經(jīng)常進(jìn)行His標(biāo)簽系統(tǒng)*學(xué)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)需求。為方便客戶的使用, 上述產(chǎn)品,Abbkine均在中國(guó)備有現(xiàn)貨。Abbkine針對(duì)中國(guó)市場(chǎng),提供**化的產(chǎn)品質(zhì)量追蹤和售后服務(wù)以及**,如果您在使用過(guò)程中有任何問(wèn)題, 請(qǐng)直接與其當(dāng)?shù)卮砩贪澜菘萍加邢薰韭?lián)系。 Abbkine His標(biāo)簽抗體 產(chǎn)品名稱及描述 品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品詳情 Anti-His Tag Mouse Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02050 詳情 HRP Conjugated Anti-His Tag Monoclonal Antibody (5C3) Abbkine A02055 詳情 Anti-His Tag Rabbit Polyclonal Antibody Abbkine A02051 詳情 美國(guó)Abbkine品牌是一家提供高性價(jià)比*學(xué)和細(xì)胞學(xué)科研產(chǎn)品及解決方案的品牌,艾美捷將其引入中國(guó),作為其中國(guó)Abbkine His抗體推薦—原裝進(jìn)口單克隆His標(biāo)簽抗體區(qū)域代理,將為客戶提供較具性 價(jià)比的常規(guī)*學(xué)試劑,如各種標(biāo)簽抗體、內(nèi)參抗體、常規(guī)一抗以及全系列二抗,抗體檢測(cè)底物以及相關(guān)試劑盒等。同時(shí)我們作為多家****品牌的的中國(guó)代理或 區(qū)域代理,艾美捷能為您提供系列的實(shí)驗(yàn)室解決方案。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,請(qǐng)致電免費(fèi)客戶專線到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。
詞條
詞條說(shuō)明
GST標(biāo)簽系統(tǒng)具有蛋白表達(dá)產(chǎn)率高、表達(dá)產(chǎn)物純化方便,以及利于GST抗體制備等特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細(xì)菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過(guò)親和層析得到,也可以直接被位點(diǎn)特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優(yōu)點(diǎn),商品化的GST融合蛋白表達(dá)體系以及GST標(biāo)簽抗體系統(tǒng)至GST抗體推薦—原裝進(jìn)口GST標(biāo)簽抗體的選擇今仍被廣泛應(yīng)用。用GST融合表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)外源基因時(shí),需要對(duì)融合表達(dá)的產(chǎn)
在*沉淀(Immunoprecipitation, IP)和*共沉淀(co-Immunoprecipitation, co-IP) 實(shí)驗(yàn)中,IP和WB的操作過(guò)程中通常會(huì)用到相同的一抗或同種屬來(lái)源的一抗,這種情況下,如果使用常規(guī)的Anti-IgG(H+L)酶標(biāo)二抗,WB實(shí)驗(yàn)中IP抗體變性后產(chǎn)生的重鏈(55kDa)和輕鏈(25kDa)都能夠識(shí)別,而此非特異的信號(hào)往往會(huì)部分甚至完全掩蓋目的蛋白的信
在*沉淀(Immunoprecipitation, IP)和*共沉淀(co-Immunoprecipitation, co-IP) 實(shí)驗(yàn)中,IP和WB的操作過(guò)程中通常會(huì)用到相同的一抗或同種屬來(lái)源的一抗,這種情況下,如果使用常規(guī)的Anti-IgG(H+L)酶標(biāo)二抗,WB實(shí)驗(yàn)中IP抗體變性后產(chǎn)生的重鏈(55kDa)和輕鏈(25kDa)都能夠識(shí)別,而此非特異的信號(hào)往往會(huì)部分甚至完全掩蓋目的蛋白的信
在*沉淀試驗(yàn)后的WB驗(yàn)證環(huán)節(jié)中,二抗的選擇往往可以避免經(jīng)常出現(xiàn)的重鏈輕鏈的干擾原因,當(dāng)使用常規(guī)的Anti-lgG(H+L)酶標(biāo)二抗時(shí),通常會(huì)出現(xiàn)對(duì)應(yīng)*沉淀一看的重鏈(55kDa)和輕鏈(30kDa)的兩條帶。如果檢測(cè)的目的蛋白分子量在55kDa或者30kDa附近時(shí),就會(huì)收到這兩條帶的干擾。針對(duì)這種情況,艾美捷推薦兩種二抗解決方案: 一種是在IP和WB實(shí)驗(yàn)中使用相同的抗體,可以通過(guò)蛋白質(zhì)分子量
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