近期了解到有實(shí)驗(yàn)人員反應(yīng),作WB實(shí)驗(yàn)有失敗的情況,懷疑與實(shí)驗(yàn)中使用的緩沖劑有關(guān),可能是緩沖劑未滅菌或配制成溶液后感染了細(xì)菌導(dǎo)致的。那么WB實(shí)驗(yàn)的失敗是否真的與緩沖劑染菌造成的呢? WB實(shí)驗(yàn)即western blot蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn),或稱為*印跡實(shí)驗(yàn),是將電泳分離后的細(xì)胞或組織中蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測(cè)某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)。WB實(shí)驗(yàn)失敗的原因有很多,緩沖劑只是其中一個(gè)影響因素。 緩沖劑長菌對(duì)WB實(shí)驗(yàn)影響 WB實(shí)驗(yàn)通常是不要求在無菌條件下操作的,因?yàn)楸緦?shí)驗(yàn)基本不會(huì)受到影響?;究梢源_定,WB實(shí)驗(yàn)的失敗不會(huì)是因?yàn)榫彌_劑染菌導(dǎo)致,是其它原因。緩沖劑里即使有殘留的細(xì)菌,其含有的蛋白質(zhì)量是較少的,如果對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生影響,那么緩沖劑肯定早已經(jīng)嚴(yán)重變質(zhì)了,會(huì)直接注意到而不會(huì)使用。緩沖劑在發(fā)生這么嚴(yán)重的污染之前應(yīng)該早就用完了。 緩沖劑離子強(qiáng)度對(duì)WB實(shí)驗(yàn)影響 緩沖劑未滅菌雖然對(duì)WB實(shí)驗(yàn)不會(huì)造成影響,不過其離子強(qiáng)度不合適有可能會(huì)造成WB實(shí)驗(yàn)失敗。實(shí)驗(yàn)中通常是采用Tris作為緩沖劑,它有著較低的離子強(qiáng)度,不過在電泳過程中,通常會(huì)增加氯化,以提高離子強(qiáng)度加快電泳速率。而離子強(qiáng)度過高的話可能造對(duì)蛋白質(zhì)造成影響,使WB實(shí)驗(yàn)失敗。另外也要控制好緩沖劑pH值,這對(duì)WB實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。 所以說緩沖劑未滅菌或染菌與WB實(shí)驗(yàn)失敗關(guān)系不大,較應(yīng)該考慮緩沖劑的離子強(qiáng)度、pH值是否合適或者樣品制備等問題。德晟是生物緩沖劑原料,可大量提供Tris、CAPS、MOPS等緩沖劑原料。
詞條
詞條說明
其實(shí)化學(xué)發(fā)光原理來自于大自然,人來不斷的探尋,螢火蟲為什么可以自行發(fā)光,燈籠魚為什么在海底也可以發(fā)光,這些都是生物發(fā)光,這種較早在生物體內(nèi)發(fā)光的現(xiàn)象也是化學(xué)發(fā)光的起源點(diǎn)。 人們通過對(duì)螢火蟲的甲殼蟲素冷熱水提取物的試驗(yàn),得出在一定條件下會(huì)發(fā)生發(fā)光的現(xiàn)象。 到了1877年,洛汾堿(2,4,5-三苯基咪唑)被發(fā)光,并且在特定物質(zhì)下可發(fā)出綠色的光,因此也得到普遍的使用。 在這之后人們對(duì)行業(yè)的熱衷促使發(fā)現(xiàn)了
體外診斷試劑MAOS優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品供應(yīng)
CAS號(hào)82692-97-5,N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3,5-dimethylaniline,sodium salt,monohydrate,中文名N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3,5-二甲基苯胺,鈉鹽,一水合物。 作為衍生物,它的外觀性狀有的是黃色有的是白色的,武漢德晟生化科技研發(fā)生產(chǎn)的MAOS產(chǎn)品質(zhì)量好,純度高,外觀為白色的晶體粉末。具
Hepes是一種通用的兩性離子緩沖劑,不結(jié)合鎂,鈣,錳或銅離子。其中細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用的緩沖液強(qiáng)度通常在10至25mm之間,在加入Hepes后,用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH。必須注意保持培養(yǎng)基中的重量克分子滲透壓濃度,并且需要評(píng)估對(duì)于給定細(xì)胞系的毒性。根據(jù)文獻(xiàn)得到,HEPES在控制pH方面**碳酸氫鈉。 Hepes的緩沖液可以通過好幾種方法來制備,可以將游離酸添加到水中,然后用大約一半摩爾當(dāng)量的**或
Tris中文品名為三羥甲基氨基甲烷;氨基丁三醇;緩血酸胺;2-氨基-2-(羥甲基)-1,3-丙二醇。是一種白色結(jié)晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯,不溶于乙mi、四氯化碳,對(duì)銅、鋁有腐蝕作用,有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。 Tris為弱堿,在25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。Tris堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值
公司名: 武漢德晟生化科技有限公司
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地 址: 湖北鄂州華容區(qū)湖北省鄂州市光谷聯(lián)合科技城C8-2
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