病毒滅活試驗

時間：2021-01-04作者：廣州市微生物研究所集團股份有限公司瀏覽：414

病毒滅活試驗適用范圍：主要適用于消毒產(chǎn)品鑒定或日常監(jiān)測。用具有一定代表性的、活的病毒及其細胞感染技術(shù)，評價各種用途的消毒因子對測試病毒的殺滅效果。按此方法進行的試驗，只是對消毒因子的滅活病毒能力的重要方面進行驗證。

病毒滅活試驗病毒懸液的制備：

1、從液氮中取出凍存的試驗用宿主細胞，在37°C溫水中迅速融化，用毛細吸管移植于含有細胞維持液的細胞管內(nèi)，吹吸數(shù)次，使混勻,立即離心(3000r/min， 3min) ，去上清液。再加入適當(dāng)?shù)募毎S持液，吹吸數(shù)次，使混勻，同上離心后，轉(zhuǎn)種于加有10培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中。逐日觀察細胞生長情況，在細胞長滿單層時，用于消毒試驗。

2、取出低溫凍存的試驗病毒毒種，37°C水浴融化，用細胞維持液作10倍稀釋，然后接種于已經(jīng)長滿單層細胞的細胞瓶內(nèi)，置37°C溫箱中，使與細胞吸附、生長。逐日觀察病變，待3/4細胞出現(xiàn)病變時，收獲病毒。

3、將含有病毒及宿主細胞的培養(yǎng)液，在冰浴條件下，用超聲波(或反復(fù)凍融)破碎宿主細胞，釋放病毒。然后，盡快離心(6000r/min,15min)去除沉淀(主要為細胞碎片)，上清液即為所需的病毒懸液。按每管1. 0分裝于無菌離心管(1.5)中。

4、取1支病毒懸液，按病毒滴度測定法，測定其病毒滴度。其余均冷凍保存于-80°C備用。

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